（一）原理及適用範（fàn）圍

將乳糖膽鹽選擇性培養基和TTC顯色劑加載在紙（zhǐ）片上，經（jīng）培養後能夠（gòu）在紙片上生長並發酵乳糖產酸的即（jí）為大腸菌群陽性（xìng），記錄每個稀（xī）釋度（dù）大腸（cháng）菌群陽性紙片數（shù），根據大腸菌群MPN表查出相應的大腸菌群數。食品大腸菌（jun1）群檢驗紙片法與國（guó）標法中的九管法相對應，將原來幾步的（de）試驗簡化為一步，時間由78h縮短為24h以內，省去了製備培養基、消和培養器皿的（de）清洗處理等大量輔助性工作，隨時可以打（dǎ）開包裝進行抽樣檢測。執行（háng）標準：食品安全國家標準食品微生物檢驗（yàn）大腸菌（jun1）群計數MPN計數法（GB 4789.3）。

適用於各類食（shí）品、飲料（liào）等樣品中（zhōng）大腸菌群的快速測定。

（二）操作方法

樣品處理：

按（àn）無菌操作稱取樣品25g（或（huò）25mL）放入含有225mL滅菌磷酸（suān）緩衝液稀（xī）釋液（或生（shēng）理鹽水）的取樣瓶或均質杯中（zhōng），經充分振搖做成1：10的（de）樣品勻液。樣品勻液的pH值應在（zài）6.5～7.5之間，必要時用1mol/L氫氧化鈉或1mol/L鹽酸調節。用1mL滅菌吸管吸取（qǔ）1：10樣品（pǐn）勻液，注入含有9mL稀釋液（yè）的（de）試管內，振搖試管製成1：100的樣品勻液。根據對（duì）樣品汙染狀況的估計，按上述操（cāo）作，一次製成10倍（bèi）遞增係列稀釋樣品勻（yún）液。每遞增（zēng）稀釋1次，換一支（zhī）1mL無菌吸管或吸頭。從製備樣品勻液（yè）至樣品接種完畢，全過程不得超過（guò）15min。

接種：

選取兩個稀釋度進行（háng）接種，普通食品一般采用1：10和1：100這兩（liǎng）個稀釋度，飲料采用原液（yè）和1：10兩個稀釋度。本（běn）品每份由三片大紙片（接10mL，袋中二片疊放算作一大片），六片小紙片（接（jiē）1mL）組成（chéng）。

用（yòng）滅菌吸管吸取10mL 1：10樣品勻液加到含有大紙片（piàn）的塑料（liào）袋中（相當（dāng）於接樣品1g），吸透後平放，做三個重複。再用1mL滅菌（jun1）吸管吸取1mL同一稀釋度的樣品（pǐn）勻液加到（dào）含有小紙片的塑料袋中（相當（dāng）於接樣品0.1g），做三個重複（fù）。再另取一支（zhī）1mL滅菌吸管吸（xī）取1mL 1：100樣品勻液加到（dào）含有小紙片的塑料袋中（相（xiàng）當於（yú）接樣品0.01g），做三個（gè）重複。

培養：

將接種好的紙片（可疊放）放入36℃±1℃培養箱中培養15～24h。

（三）大腸菌群（qún）非常可能數（MPN）的報告。

若紙片變黃（huáng）或在黃色（sè）背景上呈現紅色斑（bān）點為大腸菌群陽性紙片。紙片保持紫藍色不（bú）變或在紫藍色背景（jǐng）上呈現紅色斑點，但周圍沒有黃色均為大腸菌群陰性紙片。

記錄每個稀釋度大腸菌群陽性紙（zhǐ）片數，根據《食品飲料大腸菌群（qún）MPN表》查出相應（yīng）的大腸菌群（qún）數。

如接種的第一個（gè）梯度為原液，應將表上查出（chū）的（de）結果除以10。

（四）注意事項

新的國家標準所用的單位改為每克（或（huò）毫升）檢樣中大腸菌群非常可能數，標準的接種量（liàng）為0.333g（mL），MPN表也是由此而設計。而使用本品的標準接種量為3.33g（mL），大紙片接種10mL 1：10樣品（pǐn）勻液相當於（yú）1g樣品，因而（ér）表內數字應相應（yīng）降低10倍。飲料樣品的接種量為33.3mL，大紙片接種10mL樣品原液，表內數字應降低100倍。

（五）保存條件

本產品需存放在4℃～10℃冰箱中，保質期為一年，鋁箔袋打（dǎ）開後,未用完的紙片（piàn）要（yào）放回鋁箔袋中封好，放到冰箱中，一個（gè）月內用完。在高濕度的環境中可能出現冷凝水，非常好在拆封前將整包（bāo）回溫至室溫（wēn）。